Както е случаят, когато използвате всеки научен инструмент, трябва да се уверите, че инструментът е в добро състояние, преди да го използвате за анализ на проба. Проверката на реакцията на уреда за известна проба проверява дали уредът е правилно калибриран. Спектрофотометрите изискват периодично калибриране, за да се гарантира правилната реакция на инструмента. Инфрачервените (IR) спектрофотометри използват полистирол като стандарт за калибриране. Сканиране на инструмента с парче полистирол в държача за проба ще провери наличието на пикове, наблюдавани в IR спектрите, и относителната интензивност на пиковете.
Включете спектрофотометъра и го оставете да се загрее поне 10 минути. Времето за загряване е необходимо, за да се стабилизира източникът. Без стабилен източник не можете да разчитате на получените спектри. Аналитичният сигнал разчита на затихване на източника на излъчване от пробата.
Изпълнете стандарта за калибриране, като поставите парче полистиролов филм в държача за проба. Без тест с използване на проба от известни спектри, наречена стандарт, нямате сигурност, че спектрофотометърът работи правилно.
Вземете спектрите за пробата от полистирол. Сравнете спектрите с този в стандартна референция на ИЧ спектрите. Уверете се, че всички очаквани пикове съществуват в тестовите спектри. Местоположението на върховете трябва да е в съответствие с дължината на вълната на поглъщане.
Проверете спектрите, за да се уверите, че силата на сигнала е в рамките на 95 процента от максимума за най-силния пик. Ако най-силният пик в спектрите е повече или по-малък от пълен мащаб, регулирайте затихването, за да предадете правилната сила на сигнала.
Калибрирайте честотния спектрофотометър често. Минималната честота на калибриране трябва да включва сканиране непосредствено преди и едно непосредствено след работата ви за деня.