Съдържание
Ешерихия коли, E. coli, е бактерия, която расте в долните черва на бозайниците. Тази бактерия е открита за първи път в края на 1800г. Оттогава тя има дълга история на използване в научните изследвания. Той е най-широко използваният организъм в молекулярната генетика. Част от причината, поради която E. coli често се използва в научните изследвания, е, че е лесно да се отглежда в лаборатория. Факторите, които правят E. coli лесен за отглеждане, са неговите прости хранителни нужди, бърз темп на растеж и умерените му изисквания за поддръжка.
Стерилизирайте инокулиращия контур, като го поставите в пламъка на горелката Bunsen. Прекарайте долната половина на контура през пламъка, докато светне червено.
Оставете контура да се охлади. Можете да го докоснете до стерилния агар на чинията, за да сте сигурни, че се е охладил. Не поставяйте контура на масата и не го оставяйте да контактува с друго, освен стерилен агар или желаната култура сега, когато е стерилизиран.
Потопете контура в културата на E. coli и след това го извадете.
Отворете плочата с агар и внимателно плъзнете контура напред и назад по повърхността на един участък от агара. Внимавайте да не се надраскате през агара с примката. Агарът осигурява хранителните вещества, от които Е. коли се нуждае, за да расте.
Поставете контура в пламъка на горелката Bunsen, за да го стерилизирате. След като пръчката се охлади, докоснете я до стерилна секция на чинията, за да сте сигурни, че е хладна, след това плъзнете контура през първата си линия, за да направите втора линия. Тази втора ивица е разредена версия на първата ивица. Повтаряйте този процес на стерилизация и плъзгане, докато няколко участъка от агарната плоча не се плъзгат върху. Причината да направите това е, за да можете по-късно да изберете от единични, клонални колонии. Това ще помогне да се уверите, че имате поне една секция, която има отделни колонии - не твърде концентрирана (което ще има прекалено голям растеж и няма да ви позволи да изберете от една колония) и не прекалено разредена (което не би дало колонии) ,
Стерилизирайте контура в пламъка последен път, преди да го оставите настрана в работната зона.
Поставете горната част обратно върху плочата с агар. Обърнете плочата с главата надолу и я поставете в инкубатора, зададен на 37 градуса по Целзий (98,6 градуса по Фаренхайт). Тази идеална инкубационна температура симулира температурата на човешкото тяло, където Е. coli пребивава. В рамките на 24 до 48 часа в плочата на агара ще се появят видими колонии от бактерии E. coli.