Ензимът е протеин, който катализира (увеличава скоростта на) химични реакции. Оптималната температура на повечето ензими или температурата, при която ензимите най-добре улесняват реакциите, е между 35 и 40 градуса по Целзий. Повишаването на температурата в този прозорец увеличава скоростта на реакцията, защото възбужда молекулите и увеличава скоростта, с която ензимите / реагентите се сблъскват и реагират, за да получат продукт. Въпреки това, повишената температура твърде много може да денатурира ензима и да му попречи да работи изобщо.
Определете оптималната температура на ензима, като нагреете реакцията чрез безкрайно малки количества и вземете малки проби от реакцията, за да определите кога се появява максимална скорост на получаване на продукт.
Изберете метод. Определете как ще измервате концентрацията на вашия продукт в различни точки от експеримента. Например, можете да измервате концентрацията на много продукти, като използвате спектрофотометър и изчислявате концентрацията от абсорбцията, или чрез измерване на флуоресценцията и изчисляване на концентрацията от флуоресценцията.
Настройте експеримента си. Поставете реагентите и ензима в малък контейнер с капак, например сцинтилационен флакон. Реакцията ще започне. Поставете сцинтилационния флакон в по-голяма чаша с вода със стайна температура. Поставете чашата върху нагревателна плоча. Поставете термометър вътре в чашата. Това ви позволява да измервате температурата на реакцията в различни точки.
Вземете 100 микролитра проба от реакцията при стайна температура, около 25 градуса по Целзий. Включете нагревателната плоча. При различни температури между 30 и 40 градуса по Целзий (30,5, 31, 31,5 и т.н.) вземете 100 микролитерни проби от вашата реакция.
Определете концентрацията на вашия продукт при всяка температура. Когато температурата се повиши над 40 градуса по Целзий, ще видите намаляване на скоростта, с която субстратът се превръща в продукт, защото ензимът се денатурира. Точката, в която продуктът се произвежда с максимална скорост, е точката, в която температурата е най-оптималната.