Съдържание
Учените използват серийни разреждания (серия от разреждания 1:10), за да изчислят плътността на популацията на бактериалните култури. Когато капка култура, съдържаща малък брой бактерии, се засажда и инкубира, всяка клетка теоретично ще бъде достатъчно далеч от другите клетки, че ще образува своя собствена колония. (В действителност някои колонии може да са потомци на две близки клетки, но това е рядко при разредени култури и затова броят на колониите е много добра оценка на броя на клетките, първоначално прехвърлени в плочата.) Тъй като плътността на популацията е неизвестно, трябва да се използват различни разреждания, за да се получи една плоча с подходящ брой колонии.
Серийни разреждания
Етикетирайте шестте епруветки (всяка от които съдържа 9 ml растежна среда) като 1 до 6. Етикетирайте шестте агарови плаки като 1 до 6. Използвайте пипета и стерилни накрайници от 1 милилитър (mL), за да прехвърлите 1 ml бактериална култура в епруветка 1.
Разбъркайте добре и прехвърлете 1 ml от епруветка 1 в епруветка 2 с помощта на пипетер и стерилни накрайници от 1 ml.
Повторете стъпка 2 за останалите епруветки, като всеки път прехвърляте 1 ml от последно използваната епруветка в следващата епруветка.
Използвайте пипетер и стерилни 0,1 ml съвети, за да прехвърлите 0,1 ml от епруветка 1 в агарова плоча. Пламнете стъклена пръчка с форма на Г и я използвайте, за да разпределите капката равномерно около чинията. Инкубирайте плаката в продължение на 48 часа при подходяща температура за използваните бактерии. Различните видове бактерии имат различни оптимални температури на растеж. Ако не можете да намерите оптималната температура на растеж с помощта на референтен материал, опитайте да инкубирате плочите при 25 и 37 градуса.
Повторете стъпка 4, като всеки път прехвърляте течност от различна епруветка в съответната й плоча.
Изчисления на населението
Наблюдавайте шестте плочи и изберете тази с 30 до 200 изолирани колонии.
Умножете броя на колониите в платата с 10, за да изчислите броя на клетките на мл култура от използваната епруветка за разреждане.
Умножете числото от стъпка 2 по 10 ^ (номер на плаката), за да изчислите броя на клетките на ml от оригиналната култура. Стойността 10 ^ (номер на плаката) е коефициентът на разреждане на културата, използвана за инокулиране на тази чиния.