Съдържание
Въпреки че не могат да се видят с просто око, бактериите са навсякъде. Те съществуват в храната, почвата, водата, повърхностите в нашите домове и в и върху телата ни. Бактериите обикновено съществуват в смесени популации. Изолирането на специфична бактерия от други бактериални видове в дадена проба позволява на микробиолозите да изучават нейната структура и функция, характеристики, използвани при идентифицирането им. Микробиолозите често изолират бактериите, използвайки една от няколко техники на плаки с ивици.
Инструменти
За пренасяне на микроорганизми се използва инокулиращ контур. Състои се от нихромен или платинен проводник с малък, кръгъл контур в единия край. Другият край е прав и се плъзга в дръжка. Предлагат се и пластмасови инокулиращи бримки за еднократна употреба. Бактериите могат да бъдат изолирани само ако растат. Микробиолозите отглеждат бактерии за изолация на плаки в плитки, кръгли петри, пълни с твърда среда, наречена агар. Агар имитира средата, в която естествено растат бактериите. Съдовете, пълни с медия, са стерилни и затворени, за да се предотврати растежа на нежелани организми. По време на изолацията на плоча, инокулиращият контур многократно се стерилизира в пламъка на Bunsen горелка.
принцип
Техниката с ивици с плочи е най-популярният метод за изолиране на специфични бактерии от проба, съдържаща смес от микроорганизми. Техниката по същество разрежда броя на организмите и намалява плътността им. Тя позволява на микробиолозите да различават и изолират отделни бактериални колонии. Колонията е видим куп от бактерии. Всички бактерии в една колония произхождат от една и съща бактериална клетка. Следователно отделните колонии са „чисти“ колонии. Чистата колония се прехвърля в друга плоча, за да се получи чиста култура, състояща се от един вид бактерии.
процедура
Когато се извърши правилно, изолацията на плочи с плаки изтънява проба и дава възможност на отделни бактериални клетки да се развият в изолирани колонии. Микробиологът започва със стерилизиране на инокулиращия контур в пламък. Тя охлажда цикъла, като го докосва до агара, след това потапя примката в пробата и я разстила напред и назад, за да покрие част от плочата. Тя стерилизира цикъла, охлажда го и инокулира втори, съседен участък от плочата, като влачи примката през първата секция няколко пъти и покрива втората секция, използвайки зигзагообразно движение. Това прибира малък брой бактерии от първата секция и ги прехвърля във втората. Броят на повторенията на тази основна процедура зависи от използвания метод на плоча с ивици. Въпреки метода, оригиналната проба се използва само за инокулиране на първия участък от плаката.
Метод с лентови плаки
Методите на ивиците с ивици варират в зависимост от броя на агаровите участъци. Методът T-Streak използва три секции: горната половина и две долни секции с еднаква големина. Първоначалният инокулум се поставя в горната половина на плочата. Бактериите се влачат от горния участък до единия долен участък, след това от този долен участък до другия. При метода на квадрант са набраздени четири секции с еднаква големина. Методът на непрекъснато набраздяване обикновено включва инокулиране на горната половина на плочата, завъртане на 180 градуса и инокулиране на другата половина на плочата без стерилизиране на контура или влачене на бактерии от предишния раздел.