Съдържание
Изолирането на бактерии от почвата е важна първа стъпка в много експерименти с микробиология. След като бъдат изолирани, бактериите могат да бъдат допълнително анализирани, за да се определят неща, например вида им и функцията им в почвената среда. Дори и малко количество почва може да съдържа милиони бактерии, което налага да се разрежда почвена проба, преди да се изолират бактерии от пробата.
Измерете 100 мл. дестилирана вода в градуирания цилиндър и се добавя към стерилната бутилка.
Претегля се 1 g от почвената проба и се добавя към бутилката с дестилирана вода.Плътно затворете бутилката и я разклатете, за да смесите добре разтвора.
Етикетирайте стерилните епруветки "10 ^ -3", "10 ^ -4", "10 ^ -5" и "10 ^ -6." Добавете 9 ml дестилирана вода във всяка от епруветките, като използвате една от пипетите.
Прехвърлете 1 ml от разтвора в бутилката в епруветката с надпис "10 ^ -3", като използвате нова пипета. Запушете епруветката и я завъртете внимателно, докато разтворът се смеси добре.
Прехвърлете 1 ml от разтвора в епруветката "10 ^ -3" в епруветката "10 ^ -4" с нова пипета. Затворете капачката "10 ^ -4" и завъртете, за да се смеси. Повторете този метод, за да прехвърлите разтвора от тръбата "10 ^ -4" в тръбата "10 ^ -5" и след това от тръбата "10 ^ -5" в тръбата "10 ^ -6".
Поставете три проби всяка от тръбите "10 ^ -4", "10 ^ -5" и "10 ^ -6". Използвайте нова пипета, за да прехвърлите 1 ml разтвор от епруветката в чаша на Петри. Добавете около 15 ml хранителен агар в чинията; след това поставете капака в чинията и завъртете леко, така че агарът да покрие дъното на чинията.
Направете контролна плака, като поставите 1 ml дестилирана вода в чаша на Петри, като използвате нова пипета. Добавете агар; поставете капака и завъртете чинията.
Оставете плочките на Петри в изправено положение, докато агарът не се настрои. След това обърнете плочите и ги инкубирайте - в инкубатор или при стайна температура - за най-малко 24 часа и до пет дни.
Извадете плочите от инкубатора след желаното количество време за инкубация. Пребройте бактериалните колонии на плаки, съдържащи около 30 до 300 колонии. Използвайте постоянен маркер, за да маркирате колониите, които вече сте преброили, за да избегнете броенето на едни и същи колонии два пъти.
Разделете броя на колониите, преброени чрез разреждането - "10 ^ -4", "10 ^ -5" или "10 ^ -6" - на почвения разтвор за всяка плоча. Намерете броя на култивируемите бактерии в първоначалния грам почва, като усредните резултатите от всяка преброена плоча.