Съдържание
- Лека микроскопия и клетъчна биология
- Разработени десетки експериментални процедури
- Химически петна и лека микроскопия
- Лесно увеличение
- Предимства на флуоресцентната микроскопия
- Недостатък на светлинните микроскопи
Светлинният или комбинираният микроскоп е инструмент, с който е вероятно да се срещне всеки студент по биология. Разбирането на предимствата на светлинния микроскоп ще даде представа за овладяване на неговата полезност за класната стая или клиниката. Множеството експериментални техники, които са усъвършенствани за използване с лек микроскоп, неговата лекота на използване и относителната му достъпност в сравнение с други видове микроскопи, го правят предпочитан избор за много приложения на науката за живота.
Лека микроскопия и клетъчна биология
Тъй като клетките не могат да бъдат гледани с невъоръжено око, микроскопията е ключов компонент за изучаване на структурата и функциите на клетките. Светлинен микроскоп използва източник на светлина за осветяване на образеца на светло поле. Пробата е оцветена, за да се получат структури, които обикновено са полупрозрачни или почти безцветни, по-тъмни от фона и по-лесно видими. Друга техника на микроскопия е флуоресцентна микроскопия. Вместо да използват тъмно петно на светъл фон, клетките се оцветяват с флуоресцентни багрила и се гледат на тъмен фон.
Разработени десетки експериментални процедури
Изучаването на тъкан с лека микроскопия се практикува повече от 50 години. Светлинната микроскопия е най-достъпната форма на микроскопия по света и все още е един от основните инструменти за обучение на патолози или лекари, които диагностицират заболявания чрез изследване на микроскопичната тъканна структура. Хиляди лаборатории по света са усъвършенствали десетки експериментални процедури и много от тях се предоставят свободно на разположение. Комбинацията от ниска цена и голямото количество биологична информация, която предоставя лек микроскоп, я прави безценен инструмент за изследвания и медицина.
Химически петна и лека микроскопия
Наблюдаването на проба под лека микроскопия изисква помощта на цветни химически петна. Тези сини, червени, зелени и кафяви петна се фиксират върху тъканта с ясен химикал, наречен пермаунт, който се втвърдява при излагане на въздух. Така комбинирани, тези химически петна и тъкани издържат в продължение на много години, без да избледняват, което позволява на учените да изследват един и същ образец дълго време без загуба на цвят. Загубата на видимост е ограничение на флуоресцентната микроскопия, тъй като флуоресцентните багрила с времето избледняват.
Лесно увеличение
Способността на комбинирания микроскоп лесно да увеличава мащаба между наблюдението на опашката на малка риба на 50 пъти по-голяма от действителната й големина до видимостта на артериите в опашката ѝ на 400 пъти по-голяма от действителната големина е несравнима с други видове микроскопи. Патолозите изследват биопсии или малки парченца тъкан, отстранени от игла, под сложен микроскоп и често увеличават и намаляват, за да направят най-добрата си оценка. Съставният светлинен микроскоп остава най-добрият вариант за този тип изследвания.
Предимства на флуоресцентната микроскопия
Флуоресцентната микроскопия осигурява по-големи визуални детайли за зрителя, тъй като флуоресцентните багрила могат да бъдат насочени към специфични структури в клетката. Флуоресцентни молекули в клетъчната проба, наречени флуорофори, абсорбират светлина с една дължина на вълната и излъчват светлина с различна дължина на вълната. Флуоресцентните багрила могат да се използват със специфични протеини и антитела, за да подчертаят структурите и дори единичните молекули в клетката. Техниките на флуоресцентна микроскопия позволяват използването на множество багрила в пробата.
Недостатък на светлинните микроскопи
Микроскопската технология се взриви през последните десетилетия, като някои от по-модерните микроскопи предоставят по-подробна информация от класическия комбиниран (лек) микроскоп. Флуоресцентните микроскопи позволяват на учените да видят два различни протеина на едно и също място в клетка, използвайки червени и зелени маркери, които се припокриват, за да образуват жълт цвят. Електронните микроскопи показват триизмерните характеристики на повърхността на клетките. За да посочим един недостатък на светлинния микроскоп, той не притежава някои от усъвършенстваните възможности на флуоресцентна или електронна микроскопия, тъй като използва само бяла светлина. Въпреки това електронните микроскопи и флуоресцентни микроскопи варират в цената от десетки хиляди до стотици хиляди долари, докато в момента сложен микроскоп може да бъде закупен за едва 100 долара.